Pasgan PCR fìor-ùine Bhìoras Monkeypox

1. SampallCruinneachadh:Bu chòir sampall a chruinneachadh ann an tiùban sterile a rèir

le mion-chomharrachadh teignigeach àbhaisteach.

2. Ullachadh Reagent (Reagent Preparation Area)

Thoir a-mach na pàirtean den inneal, cothromachadh iad aig teòthachd an t-seòmair airson an cleachdadh.

3. Giullachd Sampall (Specimen Processing Area)

3.1 Às-tharraing searbhag niuclasach

Thathas a’ moladh sampallan leaghaidh 200μL a ghabhail, Smachd Deimhinneach agus Smachd àicheil airson às-tharraing searbhag niuclasach, a rèir riatanasan agus modhan co-fhreagarrach innealan às-tharraing DNA viral.

3.2 Lùghdachadh pùdar lyophilized agus cur-ris teamplaid

Ullaich premix bhìoras Monkeypox Lyophilized a rèir an àireamh de shamhlaichean.Feumaidh aon sampall aon phìob PCR anns a bheil pùdar premix Lyophilized.Bu chòir smachd àicheil & smachd adhartach a làimhseachadh mar dà shampall.

(1) Cuir 15μL Fuasgladh Fuasgladh a-steach do gach tiùb PCR anns a bheil premix Lyophilized, an uairsin cuir sampaill 5μL air an toirt a-mach / Smachd àicheil / Smachd Deimhinneach a-steach do gach tiùb PCR fa leth.

(2) Còmhdaich pìoban PCR gu teann, thoir air falbh pìoban PCR le làimh gus am bi pùdar lyophilized air a sgaoileadh gu tur agus air a choimeasgadh, cruinnich an leaghan gu bonn pìoban PCR le bhith a’ toirt a-steach centrifugation aig astar ìosal sa bhad.

(3) Ma chleachdas tu ionnstramaid PCR fìor-ùine cumanta airson lorg, an uairsin gluais pìoban PCR gu dìreach chun raon leudachaidh;ma chleachdas tu BTK-8 airson lorg, feumaidh tu na h-obraichean a leanas a dhèanamh: gluais 10 μL leaghan bho phìob PCR gu tobar chip ath-bhualadh BTK-8.Tha aon phìob PCR a’ freagairt ri aon tobar air a’ chip.Rè obrachadh pìobaireachd, dèan cinnteach gu bheil am pìobaire 90 ceum dìreach.Bu chòir na molaidhean pìoba cnap-starra aerosol a chuir ann am meadhan an tobair le feachd meadhanach agus stad air a bhith a 'putadh a' phìob nuair a ruigeas e a 'chiad gèar (gus builgeanan a sheachnadh).Às deidh na tobraichean a lìonadh, thoir a-mach membran chip ath-bhualadh gus a h-uile tobar a chòmhdach agus an uairsin thèid a’ chip a ghluasad chun àite lorg leudachaidh.

4. Meudachadh PCR (Sgìre lorgaidh)

4.1 Cuir na pìoban PCR / sliseag ath-bhualadh a-steach don tanca ath-bhualadh agus suidhich ainmean gach freagairt gu math san òrdugh iomchaidh.

4.2 Suidhichidhean flùraiseachd lorgaidh: (1) Bhìoras monkeypox (FAM);(2) Smachd a-staigh (CY5).

4.3 Ruith am protocol rothaireachd a leanas

Pròtacal de ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

 Pròtacal BTK-8:

5. Mion-sgrùdadh thoraidhean (thoir sùil air Leabhar-làimhe Cleachdaiche Ionnsramaid）

Às deidh an ath-bhualadh, thèid na toraidhean a shàbhaladh gu fèin-ghluasadach.Cliog air “Analyze” gus mion-sgrùdadh a dhèanamh, agus mìnichidh an ionnstramaid luachan Ct gach sampall sa cholbh toraidh gu fèin-ghluasadach.Bidh na toraidhean smachd àicheil agus dearbhach a rèir na leanas "6. Smachd Càileachd".

6. Smachd Càileachd

6.1 Smachd àicheil: Gun Ct no Ct> 40 ann an sianal FAM, Ct≤40 ann an sianal CY5 le lùb leudachaidh àbhaisteach.

6.2 Smachd adhartach: Ct≤35 ann an sianal FAM le lùb leudachaidh àbhaisteach, Ct≤40 ann an sianal CY5 le lùb leudachaidh àbhaisteach.

6.3 Tha an toradh dligheach ma thèid na slatan-tomhais gu h-àrd a choileanadh.Rud eile, tha an toradh neo-dhligheach.

Mìneachadh Toradh

Tha na toraidhean a leanas comasach:

NOTA: Ma thachras toradh neo-dhligheach, feumar an sampall a chruinneachadh agus a dhearbhadh a-rithist.